Agarosa Gel Elektroforesiaren oinarrizko teknikak(2)

Laginak prestatzea etaKargatzen

Gela pilatu gabe etengabeko buffer-sistema erabiltzeagatik kasu gehienetan, laginek kontzentrazio egokia eta bolumen txikia izan behar dute. Erabili apipetalagina poliki-poliki gehitzea, putzu bakoitzeko 5-10 μgrekin, bereizmenaren murrizketa nabarmena saihesteko. Noizlagina kargatzea, elikadura iturria itzali behar da. Laginak koloratzaile adierazle bat (% 0,025 bromofenol urdina edo laranja) eta sakarosa (% 10-15) edo glizerola (% 5-10) eduki behar ditu bere dentsitatea handitzeko, lagina kontzentratzeko eta difusioa saihesteko. Hala ere, batzuetan sakarosa edo glizerolak elektroforesiaren emaitzetan U formako bandak sor ditzakete, %2,5eko Ficoll (polivinilpirrolidona) erabiliz saihestu daitekeena.

1

Elektroforesia

Elektroforesirako tentsioa 5-15 V/cm-koa da, oro har 10 V/cm ingurukoa. Molekula handiak bereizteko, tentsioa baxuagoa izan behar da, normalean 5 V/cm-tik gorakoa izan gabe.

2

Tindaketa

Tindagai fluoreszenteak etidio bromuroa (EB) tindatzeko erabiltzen da normalean agarosa gelan DNA bandak behatzeko. EB DNA molekulen oinarri-bikoteen artean sar daiteke, eta EB DNArekin lotzen da. DNAren 260 nm-ko argi ultramorearen xurgapena EBra transferitzen da, eta loturiko EB-ak 590 nm-ra igortzen du fluoreszentzia argi ikusgaiaren espektro gorri-laranjan. Gela 1 mmol/L MgSO4 disoluzio batean tindatzeak ordubetez lotu gabeko EBk eragindako hondoko fluoreszentzia murrizten du, DNA kantitate txikien detekzioa erraztuz.

EB koloratzaileak hainbat abantaila ditu: erabiltzeko erraza da, ez du azido nukleikorik hausten, sentsibilitate handia du eta DNA zein RNA zikindu ditzake. EB laginari gehitu eta edozein unetan UV xurgapena erabiliz jarraipena egin daiteke. Tindu ondoren, EB ken daiteke n-butanolarekin erauzketa bidez.

Hala ere, EB koloratzailea mutageno indartsua da, eta neurriak hartu behar dira manipulatzerakoan, hala nola polietilenozko eskularruak janztea. Laranja akridina ere erabili ohi den koloratzailea da, kate bakarreko eta kate bikoitzeko azido nukleikoen artean (DNA, RNA) bereiz ditzakeelako. Fluoreszentzia berdea (530 nm) erakusten du kate bikoitzeko azido nukleikoentzat eta fluoreszentzia gorria (640 nm) kate bakarreko azido nukleikoentzat. Gainera, beste koloratzaile batzuk erabil daitezke, hala nola, metileno urdina, metileno berdea eta B kinolina.

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) elektroforesi tresnak fabrikatzen espezializatu da 50 urte baino gehiagoz gure talde tekniko profesionalarekin eta I+G zentroarekin. Ekoizpen lerro fidagarria eta osoa dugu diseinutik ikuskapenera eta biltegia, baita marketin-laguntza ere. Gure produktu nagusiak Elektroforesi-zelula (tankea/ganbera), Elektroforesiaren hornidura, LED urdinaren transilluminadorea, UV transilluminatzailea, Gel Irudia eta Analisi Sistema eta abar dira.

3

Orain bazkide bila gabiltza, bai OEM elektroforesi depositua eta banatzaileak ongi etorriak dira.

Gure produktuak erosteko planik baduzu, ez izan zalantzarik eta jar zaitez gurekin harremanetan. Mezua posta elektronikora bidal diezagukezu[posta elektronikoa babestuta]edo[posta elektronikoa babestuta], edo deitu +86 15810650221 telefonora edo gehitu Whatsapp +86 15810650221, edo Wechat: 15810650221.

Eskaneatu QR kodea Whatsapp edo WeChat-en gehitzeko.

2


Argitalpenaren ordua: 2023-12-20