Gel-elektroforesia optimizatzea: laginaren bolumena, tentsioa eta denbora-tarterako praktika onak

Sarrera

Gel-elektroforesia biologia molekularrean oinarrizko teknika bat da, proteinak, azido nukleikoak eta beste makromolekulak bereizteko oso erabilia. Laginaren bolumenaren, tentsioaren eta elektroforesiaren denboraren kontrola egokia funtsezkoa da emaitza zehatzak eta erreproduzigarriak lortzeko.Gure laborategiko lankideak eskaintzen dituSDS-PAGE gel elektroforesian parametro hauek kudeatzeko praktika onak.

3

Beijing Liuyi Bioteknologia gel elektroforesi produktuak

Laginaren bolumena: koherentzia bermatzea

SDS-PAGE elektroforesia egitean, laginaren bolumena zure emaitzen bereizmenean eragin handia izan dezakeen funtsezko faktorea da. Oro har, putzu bakoitzeko 10 µL proteina guztira kargatzea gomendatzen da. Koherentzia bermatzeko eta ondoko putzuen artean laginaren hedapena saihesteko, garrantzitsua da 1x karga-buffer bolumen berdina kargatzea edozein putzu hutsetan. Prebentzio honek ondoko bideetara laginak zabaltzea ekiditen laguntzen du, eta hori gerta daiteke putzua hutsik geratzen bada.

Zure laginak kargatu aurretik, hasi beti pisu molekularren markatzaile bat putzu batean gehitzen. Honek elektroforesiaren ondoren proteina-tamainak erraz identifikatzea ahalbidetzen du.

1

Tentsioaren kontrola: Abiadura eta Ebazpena orekatzea

Elektroforesian aplikatzen den tentsioak zuzenean eragiten du bai laginek gelan zehar migratzen duten abiaduran eta baita bereizketaren ebazpenean ere. SDS-PAGErako, 80V inguruko tentsio baxuarekin hastea komeni da. Hasierako tentsio baxu honek laginak poliki eta uniformeki migratzeko aukera ematen du, gel bereizlean sartzen diren heinean banda zorrotz batean kontzentratzen direlarik.

Laginak bereizle gelan guztiz sartu direnean, tentsioa 120V-ra igo daiteke. Tentsio handiagoa horrek migrazioa bizkortzen du, proteinak beren pisu molekularren arabera eraginkortasunez bereizten direla bermatuz. Ezinbestekoa da bromofenol urdinaren koloratzaile-frontearen aurrerapena kontrolatzea, eta horrek elektroforesia amaitu dela adierazten du. %10-12ko kontzentrazioa duten geletarako, 80-90 minutu nahikoa izaten dira normalean; hala ere, %15eko geletarako, baliteke exekuzio-denbora apur bat luzatu behar izatea.

Denboraren kudeaketa: noiz gelditu behar den jakitea

Denbora da gel elektroforesiaren beste faktore kritiko bat. Gela denbora luzeegia edo laburregia exekutatzen baduzu, bereizketa ezin hobea izan daiteke. Bromofenol urdinaren koloratzaileen migrazioa adierazle erabilgarria da: gelaren hondora iristen denean, korrika gelditzeko ordua izan ohi da. Gel estandarrentzat, adibidez, % 10-12rako, 80-90 minutu inguruko elektroforesiaren iraupena egokia da normalean. Portzentaje handiagoko geletarako, % 15 bezala, exekuzio-denbora luzatu egin behar da proteinen erabateko bereizketa bermatzeko.

Buffer-en kudeaketa: Buffer-ak berrerabili eta prestatzea

Elektroforesi buffer 1-2 aldiz berrerabili daiteke, zure laborategiko baldintza zehatzen arabera. Hala ere, emaitza optimoak lortzeko, gomendatzen da 10x buffer freskoa prestatzea eta erabili baino lehen diluitzea. Honek tamponak bere eraginkortasuna mantentzen duela bermatzen du, elektroforesiaren emaitza fidagarriagoak lortzeko.

2

Beijing Liuyi Bioteknologia gel elektroforesi produktuak

Laginaren bolumena, tentsioa eta elektroforesiaren denbora arretaz kontrolatuz, zure gel elektroforesiaren emaitzen zehaztasuna eta erreproduzigarritasuna nabarmen hobetu ditzakezu. Praktika on hauek zure laborategiko lanean ezartzeak banda argiagoak eta bereiziagoak lortzen lagunduko dizu, eta datu hobeak lortuko dituzu beheranzko analisirako.

Gel elektroforesi esperimentua optimizatzeko metodo on gehiago badituzu, ongi etorri gurekin eztabaidatzera!

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) elektroforesi tresnak fabrikatzen espezializatu da 50 urte baino gehiagoz gure talde tekniko profesionalarekin eta I+G zentroarekin. Ekoizpen lerro fidagarria eta osoa dugu diseinutik ikuskapenera eta biltegia, baita marketin-laguntza ere. Gure produktu nagusiak Elektroforesi-zelula (tanga/ganbera), Elektroforesiaren hornidura, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Irudia eta Analisi Sistema eta abar dira. PCR tresna, zurrunbilo nahastailea eta laborategirako zentrifugatzailea bezalako laborategiko tresnak ere hornitzen ditugu.

Gure produktuak erosteko planik baduzu, ez izan zalantzarik eta jar zaitez gurekin harremanetan. Mezua posta elektronikora bidal diezagukezu[posta elektronikoa babestuta]edo[posta elektronikoa babestuta], edo deitu +86 15810650221 telefonora edo gehitu Whatsapp +86 15810650221, edo Wechat: 15810650221.

Eskaneatu QR kodea Whatsapp edo WeChat-en gehitzeko.

2


Argitalpenaren ordua: 2024-abuztuaren 20a