Comet Assay (Single Cell Gel Electrophoresis, SCGE) batez ere DNAren kalteak detektatzeko eta banakako zeluletan konpontzeko erabiltzen den teknika sentikorra eta azkarra da. "Comet Assay" izena emaitzetan agertzen den kometa-itxurako ezaugarri berezitik dator: zelularen nukleoak "burua" eratzen du, kaltetutako DNA zatiek migratzen duten bitartean, kometa baten antza duen "buztana" sortuz.
Printzipioa
Comet Assay-ren printzipioa eremu elektriko batean DNA zatien migrazioan oinarritzen da. DNA osorik zelulen nukleoan geratzen da, eta kaltetutako edo zatitutako DNA anodorantz migratzen den bitartean, kometaren "buztana" osatuz. Isatsaren luzera eta intentsitatea DNAren kaltearen neurriarekin zuzenean proportzionala da.
Prozedura
- Zelulen Prestaketa: Aztertu beharreko zelulak fusio-puntu baxuko agarosarekin nahasten dira eta mikroskopioko diapositibetan zabaltzen dira geruza uniforme bat osatzeko.
- Zelula Lisia: Diapositibak lisi-soluzio batean murgiltzen dira zelula-mintza eta mintz nuklearra kentzeko, DNA agerian utziz.
- Elektroforesia: Diapositibak elektroforesi-ganbera batean jartzen dira baldintza alkalino edo neutroetan. Kaltetutako DNA zatiak elektrodo positiborantz migratzen dira eremu elektrikoaren eraginez.
- Tindaketa: Elektroforesiaren ondoren, diapositibak koloratzaile fluoreszente batekin (adibidez, etidio bromuroa) tindatzen dira DNA ikusteko.
- Analisi Mikroskopikoa: Fluoreszentzia mikroskopioa edo software espezializatua erabiliz, kometaren formak aztertzen dira, eta isatsaren luzera eta intentsitatea bezalako parametroak neurtzen dira.
Biorender-eko irudia
Datuen Analisia
Comet Assay-aren emaitzak funtsezko parametro batzuen arabera ebaluatzen dira:
- Isatsaren luzera: DNAk migratzen duen distantzia adierazten du, DNAren kaltearen norainokoa adieraziz.
- Buztana DNA edukia: Isatsera migratzen den DNAren ehunekoa, askotan DNAren kaltearen neurketa kuantitatibo gisa erabiltzen dena.
- Oliba buztanaren unea (OTM): Isatsaren luzera eta buztanaren DNAren edukia konbinatzen ditu, DNAren kalteen neurketa zabalagoa emateko.
Aplikazioak
- Genotoxikotasun-azterketak: Comet Assay oso erabilia da substantzia kimikoek, botikek eta erradiazioak zelulen DNAn duten eragina ebaluatzeko, genotoxikotasun-probak egiteko funtsezko tresna bihurtuz.
- Ingurumen Toxikologia: Ingurugiro-kutsatzaileek organismoen DNAn duten eragina aztertzen laguntzen du, ekosistemen segurtasunari buruzko argibideak emanez.
- Ikerketa mediko eta klinikoa: Comet Assay DNAren konponketa mekanismoak, minbizia eta DNArekin lotutako beste gaixotasun batzuk aztertzeko erabiltzen da. Era berean, erradioterapia eta kimioterapia bezalako minbizi-terapiek DNAn duten eragina ebaluatzen du.
- Elikadura eta Nekazaritza Zientziak: Pestiziden, elikagaien gehigarrien eta beste substantzien segurtasuna ebaluatzeko eta animalia-ereduetan dituzten efektu toxikoak aztertzeko erabiltzen da.
Abantailak
- Sentsibilitate handia: DNAren kalte maila baxuak detektatzeko gai da.
- Eragiketa sinplea: Teknika zuzena da, eta errendimendu handiko emanaldiarako egokia da.
- Aplikazio zabala: Hainbat zelula motari aplika daiteke, animalia eta landare zeluletan barne.
- Kuantifikazioaren erronkak: DNAren kalteei buruzko datu kualitatiboak eskaintzen dituen bitartean, analisi kuantitatiboak softwarean eta irudien analisi tekniketan oinarritzen dira.
- Baldintza esperimentalak: Emaitzetan elektroforesiaren denbora eta pH bezalako faktoreek eragin dezakete, baldintza esperimentalak arretaz kontrolatu behar direlarik.
Mugak
Comet Assay tresna eskerga da ikerketa biomedikoan, ingurumen-zientzian eta sendagaien garapenean, DNAren kalteak detektatzeko eta konpontzeko duen malgutasunagatik eta sentikortasun handiagatik. Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Bioteknologia)elektroforesi-ganbera horizontala eskaintzen du kometaren saiakuntzarako. Ongi etorri gurekin harremanetan jartzeari buruz eztabaidatzekoKometa Saiakuntzaprotokoloa.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) elektroforesi tresnak fabrikatzen espezializatu da 50 urte baino gehiagoz gure talde tekniko profesionalarekin eta I+G zentroarekin. Ekoizpen lerro fidagarria eta osoa dugu diseinutik ikuskapenera eta biltegia, baita marketin-laguntza ere. Gure produktu nagusiak Elektroforesi-zelula (tanga/ganbera), Elektroforesiaren hornidura, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Irudia eta Analisi Sistema eta abar dira. PCR tresna, zurrunbilo nahastailea eta laborategirako zentrifugatzailea bezalako laborategiko tresnak ere hornitzen ditugu.
Gure produktuak erosteko planik baduzu, ez izan zalantzarik eta jar zaitez gurekin harremanetan. Mezua posta elektronikora bidal diezagukezu[posta elektronikoa babestuta]edo[posta elektronikoa babestuta], edo deitu +86 15810650221 telefonora edo gehitu Whatsapp +86 15810650221, edo Wechat: 15810650221.
Eskaneatu QR kodea Whatsapp edo WeChat-en gehitzeko.
Argitalpenaren ordua: 2024-09-20