Gel elektroforesia DNAren analisirako biologia molekularrean erabiltzen den metodo nagusietako bat da.Metodo honek DNA zatiak gel baten bidez migratzea dakar, non tamainaren edo formaren arabera bereizten diren.Hala ere, inoiz aurkitu al duzu akatsik zure elektroforesi esperimentuetan, hala nola agarosa gelan banda zikinduta, edo gelan bandarik ez?Zein izan daiteke akats horien kausa?
Gure teknikariek arazoen konponketa pare bat laburbildu dituzte hemen zure erreferentzia izateko.
1. Lohitutako bandak agarosa gelan
●DNA degradatu zen.Saihestu nukleasen kutsadura.
● Elektroforesi buffera ez dago freskoa.Elektroforesi buffera behin eta berriz erabili ondoren, indar ionikoa gutxitzen da eta bere pH balioa handitzen da, beraz, tamponaren ahalmena ahuldu egiten da eta horrek elektroforesi efektuari eragiten dio.Elektroforesi buffera maiz ordezkatzea gomendatzen da.
● Elektroforesi baldintza desegokiak erabili ziren.Ez utzi tentsioa 20 V/cm-tik gorakoa izan dadin, eta mantendu tenperatura <30°C elektroforesian.DNA kate erraldoiaren elektroforesirako, tenperatura <15° C-koa izan behar da. Egiaztatu elektroforesi-buferrak nahikoa tampon-ahalmena duela.
● Gelan DNA gehiegi kargatu zen.ADN kopurua gutxitu.
● Gatz gehiegi DNAn.Erabili etanolaren prezipitazioa aldez aurretik gehiegizko gatzak kentzeko.
● DNA proteinaz kutsatuta zegoen.Erabili fenol erauzketak proteina aurreratuan kentzeko.
● DNA desnaturalizatu egin zen.Ez berotu elektroforesiaren aurretik.Diluitu DNA tamponean 20 mM NaCl-arekin.
2. Anomaliak DNA bandaren migrazioa
● λHind III zatiaren COS gunearen birnaturalizazioa.Berotu DNA 5 minutuz 65° C-tik behera elektroforesiaren aurretik, eta gero hoztu izotz-unitate batean 5 minutuz.
● Elektroforesi baldintza desegokiak erabili ziren.Ez utzi tentsioa 20 V/cm-tik gorakoa izan dadin, eta mantendu tenperatura <30°C elektroforesian.Egiaztatu elektroforesi-buferrak nahikoa tampon-ahalmena duela.
● DNA desnaturalizatu egin zen.Ez berotu elektroforesiaren aurretik.Diluitu DNA tamponean 20 mM NaCl-arekin.
3. Agarosa gelan DNA banda ahulak edo ez
● Gelan kargatutako DNAren kantitate edo kontzentrazio nahikorik ez zegoen.ADN kopurua handitu.Poliakrilamida gel elektroforesia agarosa elektroforesia baino zertxobait sentikorra da, eta laginaren karga behar bezala murriztu daiteke.
● DNA degradatu egin zen.Saihestu nukleasen kutsadura.
● DNAri elektroforesa egin zitzaion geletik.Elektroforesatu gela denbora gutxiagoz, erabili tentsio baxuagoa edo erabili ehuneko gel handiagoa.
● W argi iturri desegokia erabili zen etidio bromuroz zikindutako DNA bistaratzeko.Erabili uhin laburreko (254 nm) W argia sentikortasun handiagoa lortzeko.
4. DNA bandak falta dira
●Tamaina txikiko DNAri elektroforesa egin zitzaion geletik.Elektroforesatu gela denbora gutxiagoz, erabili tentsio baxuagoa edo erabili ehuneko gel handiagoa.
● Antzeko molekularraren DNA-bandak bereiztea zaila.Handitu elektroforesi denbora, eta egiaztatu kontzentrazioagelaren ehuneko gel behar bezala erabili behar dela ziurtatzeko.
● DNA desnaturalizatu egin zen.Ez berotu elektroforesiaren aurretik.Diluitu DNA tamponean 20 mM NaCl-arekin.
● DNA kateak izugarriak dira, eta ohiko gel elektroforesia ez da egokia.Pultsu-gel elektroforesian aztertzea.Zer beste arazo izan dituzu agarosa gel elektroforesiarekin?Etorkizunean gehiago ikertuko ditugu gidak lortzeko.
Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) Txinan elektroforesiarekin lotutako produktuetan zentratzen den enpresa espezializatua da.Bere istorioa 1970ean hasten da Txina oraindik erreforman eta irekitze garaian sartu ez zenean.Urteetako garapenaren bidez, Liuyi Bitotech-ek bere marka du, elektroforesi produktuen barne merkatuan Liuyi Marka bezala ezagutzen dena.
Liuyi markak 50 urteko historia baino gehiago du Txinan eta konpainiak produktu egonkorrak eta kalitate handikoak eskain ditzake mundu osoan.Urteetako garapenaren bidez, zure aukera merezi du!
Liuyi Biotech-en elektroforesi zelula horizontalak (tanga/ganberak) kalitate handikoak dira, itxura ona dutenak.Gel-erretiluen tamaina desberdinekin, zure eskakizun esperimental desberdinak bete ditzakete.Gure talde teknikoa eta fabrika dugu.Diseinutik fabrikaziora, lehengaietatik funtsezko zatietaraino, prozesu osoa kontrola dezakegu.DYCP 31 seriea DNA elektroforesirako da, ereduak direnakDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, etaDYCP-31E.Horien arteko desberdintasunak gelen tamainak eta prezioa dira.Tamaina osoko produktuak eskaintzen dizkiegu gure bezeroei.EreduaDYCP-32Cgel handiena 250mm * 250mm egin dezake.
Bien bitartean, gure elektroforesiaren hornidura gomendatzen duguDYY-6C,DYY-6DetaDYY-10Cgure elektroforesi-zeluletarako (tankeak/ganberak) DYCP-31 eta 32 serieak.
Produktuei buruzko informazio gehiago nahi baduzu, bisitatu webgune hau gehiago lortzeko, eta ongi etorri gurekin harremanetan posta elektroniko bidez, zer nahi duzun jakinarazteko eta ea irtenbideak eman ditzakegun.
Guri buruzko informazio gehiago lortzeko, jar zaitez gurekin harremanetan posta elektronikoz[posta elektronikoa babestuta], [posta elektronikoa babestuta].
Argitalpenaren ordua: 2022-09-05