Printzipioa
Zelulosa azetato film elektroforesia elektroforesi metodo bat da, zelulosa azetato film euskarri gisa erabiliz.Eremu elektrikoaren eraginez kontrako elektrodorantz mugitzen diren partikula kargatuak elektroforesi deritzo.Proteina bakoitzak puntu isoelektriko zehatz bat duenez, proteina bat bere puntu isoelektrikoa baino pH baxuagoa duen disoluzio batean jartzen bada, proteina positiboki kargatuko da eta elektrodo negatiborantz joango da.Aitzitik, polo positiborantz mugitzen da.Eremu elektriko batean mugitzen diren proteina molekulen abiadura haien kargarekin, molekulen formarekin eta tamainarekin erlazionatuta dagoenez, elektroforesiaren bidez proteina desberdinak bereiz daitezke.Serumak hainbat proteina ditu, eta horiek guztiek puntu isoelektrikoak dituzte pH 7,5 edo txikiagoan.Serum elektroforesia egiteko 8,6 pH-ko tamponean jartzen denean, serum proteina guztiak negatiboki kargatuta daude eta eremu elektrikoan alde positiborantz mugituko dira.Serum proteina ezberdinek pH berean karga desberdinak dituztenez, partikula molekularrak tamainaz desberdinak dira eta, beraz, migrazio-abiadura desberdina da, eta elektroforesiaren bidez bereizten dira.Serum-proteinen puntu isoelektrikoak eta pisu molekularrak beheko taulan ageri dira:
| Proteina | Puntu isoelektrikoak (PI) | Pisu molekularra |
| Albumina | 4.88 | 69.000 |
| α1-gloulina | 5.00 | 200.000 |
| α2-gloulina | 5.06 | 300.000 |
| β-gloulina | 5.12 | 9 000 ~ 150 000 |
| γ-gloulina | 6,85~7,50 | 156 000 ~ 300 000 |
Esperimentua odol-serumean proteina desberdinak bereiztea da, euskarri gisa zelulosa azetato mintzarekin (CAM laburdura).CAM apar-loo moduko bat daeuniforme ona duen filma eta lodiera 0,1 mm-1,5 mm-koa da, uraren xurgapen jakin bat duena.
CAM Elektroforesirako materialak, tresnak eta erreaktiboak
Laginak:giza odol-serum osasuntsua
Instrumentua:DYY-6C elikadura hornidura, elektroforesi depositua DYCP-38C, goi mailako lagin-karga WD-9404
Erreaktiboak
1) zelulosa azetato mintza 7X9cm
2) PH 8,6 barbitol tampon-disoluzioa (indartasun ionikoa 0,05-0,09, 0,06 tid denbora da): hartu 1,84 g azido dietil barbiturikoa, eta, ondoren, 1,03 g dietil sodio pentobarbital, gehitu ur destilatu pixka bat berotzeko eta egin disolbatzeko. 1000 ml arte;
3) Orbana: Ponceau S 0.2g, Trichloroacetic 3g, gehitu 100ml ur destilatua;
4) TBS/T edo PBS/T: 45ml 95% etanola, 5ml azido azetiko glaziala, gehitu 50ml ur destilatua;
5) Garbiketa irtenbidea: 70 ml etanol anhidroa, 30 ml azido azetiko glaziala.
Esperimentua Method
1) Prestatu mintza: murgildu mintza barbitol buffer soluzioan 30min-8h, eta atera, kendu aparteko disoluzioa paper xurgatzailez.
2) Laginak kargatzea: bereizi mintzaren alde zakarra eta alde leuna, eta markatu marra bat 1,5 cm-ko distantziara goiko muturreraino alde zakarretik.Kargatu laginak laginak kargatzeko tresna nagusiarekin alde zakarrean.Oharra: laginak mintzaren alde zakar batean kargatu behar dira.Serum-laginak mintzean guztiz sartu ondoren, irauli mintza, jarri alde zakarra (laginekin) deposituari begira, eta laginak dituen muturra elektrodo negatiboan jartzen da.
3) Elektroforesia: Piztu elikadura iturria, 0,4～0,6 m A/cm-ko mintza, iraupena 30-45 min da.Elektroforesia exekutatu ondoren, itzali energia.
4) Zikintzea eta garbitzea: atera mintza depositutik, eta murgilduit tindagai-soluzioan sartu 5 minutuz, eta gero garbitu garbiketa-soluzioan behin eta berriz 3-4 aldiz atzeko kolorea argia izan arte.Serum proteinak bandetan erakutsi behar dira, eta normalean bost zona daude, markatutako lerroaren goiko muturrean, Albumina, α1-gloulina, α2-gloulina, β-gloulina, γ-gloulina.
5) Kontserbazioa: elektroforesi lehorra jarribanda10-15 minutuz garbiketa-soluzioan, eta gero atera eta edalontzi garbi batean itsatsi, lehortu ondoren, film garden bihurtuko da.banda.
EsperimentuaEmaitza
Serum laginen bereizketa-efektua ona da, eta ez dago banda-isatsen fenomenorik.Emaitzen errepikakortasuna aldatu egiten da proba-prozeduren eta esperimentatzailearen metodoen ondorioz, eta errepikagarritasuna handia da.
Ondorioa
Elektroforesi klinikoa detektatzeko sistema azkarra (Elektroforesi deposituaDYCP-38C,energia horniduraDYY-6C eta goi-mailako lagin kargatzeko WD-9404) gureak ekoitzitakoenpresa Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltdeskakizun esperimentalak betetzen ditu,etaemaitzak erreproduzigarriak dira, sinpleak eta azkarrak, egokiakirakaskuntzaikerketa.
Beijing LiuyiBiotechnology Co., Ltd bizitza zientzien industriarako elektroforesi produktuak fabrikatzen espezializatuta dago.50 urteko historia baino gehiago du Txinan eta konpainiak produktu egonkorrak eta kalitate handikoak eskain ditzake mundu osoan.Urteetako garapenaren bidez, zure aukera merezi du!
Orain bazkide bila gabiltza, bai OEM elektroforesi depositua eta banatzaileak ongi etorriak dira.
Guri buruzko informazio gehiago lortzeko, jar zaitez gurekin harremanetan posta elektronikoz[posta elektronikoa babestuta]edo[posta elektronikoa babestuta].
Argitalpenaren ordua: 2022-11-14