Joan den astean hainbat gogoeta partekatu genituen zelulosa azetatoaren mintzaren elektroforesia erabiltzeko, eta gaur hemen amaituko dugu gai hau zure erreferentzia izateko.
-ren hautaketa Buffer-kontzentrazioa
Zelulosa azetatoaren mintzaren elektroforesian erabiltzen den buffer-kontzentrazioa, oro har, paperezko elektroforesian erabiltzen dena baino txikiagoa da.Normalean erabiltzen den pH 8,6BArbital buffer normalean 0,05 mol/L eta 0,09 mol/L arteko tartean aukeratzen da.Kontzentrazioa hautatzerakoan, aurretiazko zehaztapena egiten da.Esate baterako, elektroforesi ganberako elektrodoen arteko mintz-zerrendaren luzera 8-10 cm-koa bada, 25V-ko tentsioa behar da mintzaren luzeraren zentimetro bakoitzeko, eta korrontearen intentsitatea 0,4-0,5 mA izan behar du mintzaren zabaleraren zentimetro bakoitzeko.Elektroforesian balio horiek lortzen edo gainditzen ez badira, buffer-kontzentrazioa handitu edo diluitu behar da.
Buffer-kontzentrazio baxuegiak banden mugimendu azkarra eta banda-zabalera handitzea eragingo du.Bestalde, tamponen kontzentrazio handiegiak banda-migrazioa moteldu egingo du, zenbait bereizketa-banda bereiztea zailduz.
Kontuan izan behar da zelulosa azetato mintzaren elektroforesian korrontearen zati garrantzitsu bat laginaren bidez eramaten dela, eta horrek bero kopuru handia sortzen du.Batzuetan, aukeratutako buffer kontzentrazioa egokitzat jo daiteke.Dena den, ingurumen-tenperatura igotzeko baldintzetan edo tentsio handiagoa erabiltzen denean, beroaren ondoriozko uraren lurrunketa areagotu egin daiteke, eta, ondorioz, tamponen kontzentrazio handiegia da eta baita mintza lehortzea ere.
Laginaren bolumena
Zelulosa azetato mintzaren elektroforesian, laginaren bolumenaren zenbatekoa hainbat faktorek zehazten dute, besteak beste, elektroforesiaren baldintzak, laginaren beraren propietateak, tindaketa metodoak eta detekzio teknikak.Printzipio orokor gisa, detekzio-metodoa zenbat eta sentikorragoa izan, orduan eta txikiagoa izan daiteke laginaren bolumena, eta hori bereizteko abantailatsua da.Laginaren bolumena gehiegizkoa bada, baliteke bereizketa elektroforetikoen ereduak argiak ez izatea, eta orbanak ere denbora asko eskatzen du.Hala ere, banandutako banda orbantuak kuantitatiboki aztertzean eluzio koloremetrikoen detekzio-metodoak erabiliz, laginaren bolumena ez da oso txikia izan behar, osagai jakin batzuen absorbantzia-balio txikiagoak eragin ditzakeelako, haien edukia kalkulatzean errore handiagoak sor ditzakeelako.Kasu horietan, laginaren bolumena behar bezala handitu behar da.
Normalean, laginaren aplikazio-lerroaren zentimetro bakoitzean gehitzen den laginaren bolumena 0,1 eta 5 μL bitartekoa da, 5 eta 1000 μg bitarteko laginaren baliokidea.Esate baterako, serum proteina elektroforesiaren ohiko analisian, aplikazio-lerroaren zentimetro bakoitzean gehitzen den lagin-bolumena, oro har, ez da 1 μL gainditzen, 60 eta 80 μg proteinaren baliokidea.Hala ere, elektroforesi-metodo bera erabiliz lipoproteinak edo glikoproteinak aztertzen direnean, laginaren bolumena behar bezala handitu behar da.
Ondorioz, baldintza zehatzetan oinarrituta lagin-bolumen egokiena aukeratu behar da aurretiazko esperimentu batzuen bidez.
Tindatzeko irtenbidearen hautaketa
Zelulosa azetatoaren mintzaren elektroforesian bereizitako bandak normalean detektatu aurretik tindatzen dira.Lagin-osagai desberdinek tindaketa-metodo desberdinak behar dituzte, eta baliteke zelulosa azetatoaren mintzaren elektroforesirako egokiak diren tindaketa-metodoak iragazki-paperari guztiz aplikagarriak ez izatea.
Hiru printzipio nagusi daude tindaketa irtenbidea aukeratzekozelulosa azetato mintza.Lehenik eta behin,Uretan disolbagarriak diren koloratzaileak hobetsi behar dira alkohol disolbagarriak diren koloratzaileak baino, azken honen tindaketa-soluzioak eragindako mintza uzkurtzea eta deformatzea ekiditeko.Tindu ondoren, garrantzitsua da mintza urarekin garbitzea eta tindaketaren iraupena minimizatzea.Bestela, mintza kizkurtu edo txikitu egin daiteke, eta horrek ondorengo detekzioan eragingo luke.
Bigarrenik, hobe da laginarentzat tindaketa-afintasun handia duten koloratzaileak hautatzea.Serum proteinen zelulosa azetato mintzaren elektroforesian, 10B amino beltza erabiltzen da normalean serum proteina-osagai ezberdinekiko tindaketa-afintasun handia duelako eta egonkortasuna duelako.
Hirugarrenik, kalitate fidagarriak diren koloratzaileak aukeratu behar dira.Tindagai batzuek, izen bera izan arren, tindatu ondoren hondo bereziki iluna sortzen duten ezpurutasunak izan ditzakete.Horrek jatorriz ondo bereizitako bandak lausotu ditzake, eta horiek bereiztea zaila da.
Azkenik, tindaketa-disoluzioaren kontzentrazioa aukeratzea garrantzitsua da.Teorian, badirudi tindaketa-disoluzio-kontzentrazio handiagoak laginaren osagaien tindaketa sakonagoa eta emaitza hobeak ekarriko dituela.Hala ere, ez da horrela.Laginaren osagaien eta koloratzailearen arteko lotura-afinitateak muga jakin bat du, eta hori ez da handitzen tindaketa-disoluzioaren kontzentrazioa handitzean.Aitzitik, tindaketa-soluzio-kontzentrazio handiegiak koloratzailea alferrik galtzeaz gain, hondo argia lortzea ere zaildu egiten du.Gainera, kolorearen intentsitatea balio maximo jakin batera iristen denean, koloratzailearen xurgapen-kurbak ez du erlazio lineal bat jarraitzen, batez ere neurketa kuantitatiboetan.Zelulosa azetatoaren mintzaren elektroforesian, tindaketa-disoluzioaren kontzentrazioa, oro har, paperezko elektroforesian erabiltzen dena baino txikiagoa da.
Beijing Liuyi Bioteknologiari buruz ezagutzeko xehetasunak's zelulosa azetato mintzaelektroforesi depositua eta bere elektroforesi aplikazioa, mesedez bisitatu hemen:
lSerum proteina zelulosa azetato mintzarekin bereizteko esperimentua
lZelulosa Azetato Mintza Elektroforesia
lHainbat kontu kontuan izan behar dira Zelulosa Azetato Mintza Elektroforesia erabiltzean (1)
Gure produktuak erosteko planik baduzu, ez izan zalantzarik eta jar zaitez gurekin harremanetan.Mezua posta elektronikora bidal diezagukezu[posta elektronikoa babestuta]edo[posta elektronikoa babestuta], edo deitu +86 15810650221 telefonora edo gehitu Whatsapp +86 15810650221, edo Wechat: 15810650221.
Erreferentzia:Elektroforesia (Bigarren edizioa) Li jaunaren eskutik
Argitalpenaren ordua: 2023-06-06